虎尾天后宮坐落於雲林縣虎尾鎮北平路18號，在地居民習稱「二媽廟」，是虎尾鎮最具代表性的媽祖信仰場所之一。廟宇主祀玉二聖母，鎮殿金尊則為台南市祀典大天后宮大媽副駕，因此廟名仍沿用天后宮，歷史淵源深遠。
本廟香火源起於民國四十三年（1954年），由信眾前往台南市山上天后宮迎請天上聖母香火，返回虎尾後雕塑金身，最初安奉於中山里中正路廟前巷一號的吳榮陞善信家中，在民間香火口耳相傳、廣受信仰後，地方信眾深感聖母神恩浩大，遂於民國五十三年（1964年）由聖母指示擇定現址，破土興工，同年十二月落成完廟，正式奠定虎尾天后宮的廟基。廟宇建成後，以其靈驗著稱於虎尾一帶，吸引周邊鄉鎮信徒絡繹前來參拜。
2010年廟方啟動重建工程，以更宏偉的建築規模取代舊廟，建設期間廟方依舊維持香火不斷，信眾祭祀活動未曾中輟。重建後的天后宮建築格局端莊大氣，廟埕寬闊，殿堂層次分明，以傳統閩南式廟宇建築工法打造，廟頂剪黏裝飾精細，交趾陶彩塑故事典故栩栩如生，是研究傳統廟宇工藝的良好場所。
每逢媽祖誕辰（農曆三月二十三日），廟方都會舉辦盛大的祭典活動，結合遶境、藝陣表演、戲曲演出等傳統民俗，吸引大批信眾及遊客共襄盛舉，廟埕及周邊街道人潮洶湧，是體驗雲林民間宗教文化的絕佳時機。此外，廟宇平日也提供問事、求籤等服務，是虎尾居民日常生活的心靈寄託。
值得一提的是，虎尾天后宮的玉二聖母供奉方式在台灣廟宇中較為罕見。廟中媽祖並非典型的媽祖造像，而是以「玉二聖母」為尊稱，這與香火分靈的源頭——台南山上天后宮的祀神體系有關。此一特殊的神明稱謂，吸引了不少對台灣媽祖信仰有研究興趣的訪客前來探訪，廟內的沿革碑記與文物收藏，也是梳理這段信仰傳播史的重要資料。
虎尾天后宮地處虎尾鎮市區核心，交通便利，鄰近有虎尾舊糖廠文化園區、虎尾布袋戲館等重要觀光景點，遊客可將多處景點串聯遊覽。虎尾糖廠保存了台灣製糖工業的珍貴歷史遺跡，蒸汽五分車是昔日糖業繁榮的象徵，布袋戲館則展示了雲林作為布袋戲之鄉的深厚文化底蘊，與天后宮同遊可深入感受虎尾鎮多元的人文風貌。自行開車由國道一號斗南交流道或西螺交流道前往均可，路程約15至20分鐘；搭乘大眾運輸可先到虎尾轉運站，再步行或轉乘市區公車前往。
