斗六聖玫瑰天主堂坐落於雲林縣斗六市中華路80號，是雲林縣歷史最悠久的天主教堂之一，創設迄今已逾140年，不僅是台灣天主教傳播史的重要見證地，也是斗六市中西文化交融的珍貴建築遺產。
本堂的傳教起源可追溯至1882年（清光緒八年）。當年，西班牙籍道明會神父王靈牧（Manuel Garcia）與杭若望在斗六設立傳教所，正式將天主教引入斗六地區，聖玫瑰天主堂即為開教的濫觴，在台灣西部天主教傳播史上佔有重要的一頁。
然而建教之路並非一帆風順。1895年甲午戰爭後台灣割讓日本，社會局勢動盪不安，流言指稱教會神父與日軍有所往來，引發民眾不滿，教堂遭到焚毀，多名教友亦受到迫害，史稱「斗六教難」，是台灣天主教史上一段沉重的記憶。1918年，道明會在道明會的協助下，於斗六原址重建磚造二層樓聖堂，但1941年嘉義大地震再度重創建築，使聖堂嚴重受損。
現存的教堂建築為民國42年（1953年）由牛會卿主教主持重建，建築風格採仿巴洛克式，高聳的穹窿堂頂為其最顯著的外觀特色，搭配對稱的立面設計，莊嚴典雅，在斗六市區中格外醒目。走進教堂，光線透過彩繪玻璃灑入殿內，形成斑斕光影，氣氛肅穆而聖潔。
教堂最引人入勝之處，是外觀陳列的一方清康熙皇帝所題「萬有真原」匾額及對聯。這方匾額將中國帝王的書法與天主教堂的西洋建築並置，形成獨一無二的中西文化交融景觀。據考，「萬有真原」意指萬物的真實根源，以儒家天道觀詮釋天主教的上帝概念，匾額的存在彰顯了天主教在傳入中國時的本地化策略，是極具文化意涵的文物。
教堂內部陳設典雅，長廊座椅、彩繪玻璃窗及十字架等基督宗教元素，在台灣南方的陽光照耀下呈現出特殊的宗教美感。聖堂每週固定舉行彌撒，歡迎有意願的訪客在不干擾宗教儀式的前提下入內靜觀，感受與台灣傳統廟宇截然不同的精神空間。對於對歐洲宗教建築風格有興趣的旅人，斗六聖玫瑰天主堂提供了一次在台灣難得一見的美學體驗。
斗六聖玫瑰天主堂開放一般民眾入內參觀，無論是建築愛好者、歷史文化研究者，或對台灣宗教多元性感興趣的訪客，皆適合造訪。周邊可順道遊覽斗六市區，參訪斗六受天宮（門受天宮）、斗六太平老街，感受斗六市的深厚文化底蘊。斗六太平老街保存了清代到日治的歷史建築，是雲林縣重要的老街風景。自行開車或搭乘公路客運抵達斗六轉運站後，步行或搭乘市區公車即可抵達。
